【簡介】
分選酶（Sortase）是一類由革蘭氏陽性菌（如金黃色葡萄球菌、鏈球菌等）分泌的轉(zhuǎn)肽酶。它們通過識別特定氨基酸序列，并催化其與細胞壁或細胞膜形成共價連接，從而在細菌的生理活動和致病機制中行使重要功能。我們可以利用上述反應(yīng)活性，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域發(fā)揮重大價值。
本品為Sortase A（SrtA）的突變體，特異性識別LPXTG基序（X為任意氨基酸），切割蘇氨酸（T）和甘氨酸（G）之間的肽鍵，然后將切割后的蛋白羧基端與多聚甘氨酸（通常為GGGGG）受體橋連，完成錨定。活性較野生型有顯著提升。
圖：Schematic representation of how proteins are anchored to the cell wall via sortase in Gram-positive bacteria. [1]
【應(yīng)用】
I．抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）的定點偶聯(lián)
Sortase A可實現(xiàn)毒素分子與抗體的高精度偶聯(lián)，克服傳統(tǒng)化學(xué)偶聯(lián)導(dǎo)致的產(chǎn)物異質(zhì)性問題，通過識別抗體C端的LPETG序列，將小分子藥物（如毒素或熒光標記）通過寡聚甘氨酸（Gly3-Gly5）連接，生成DAR值均一（通常為2或4） 的ADC，顯著提升藥物穩(wěn)定性和療效。
II. 抗菌藥物開發(fā)靶點
作為金黃色葡萄球菌毒力因子，Sortase A可被小分子抑制劑（如丹酚酸A）靶向抑制，降低細菌致病性，用于治療耐藥菌感染（如MRSA肺炎）。
III. 蛋白質(zhì)標記與功能化
比如：位點特異性連接熒光基團（如FITC）、生物素或金屬螯合物，用于蛋白質(zhì)示蹤或檢測。
比如：修飾細胞膜蛋白，實現(xiàn)配體定向展示或細胞功能重編程。
IV. 酶工程/生物催化
比如：酶分子寡聚化，在(S)-羰基還原酶C端添加GGGGSLPETGG序列，經(jīng)Sortase A催化形成多聚體，使比酶活大幅提升，熱穩(wěn)定性增強，并大幅縮短生物轉(zhuǎn)化時間。
比如：環(huán)化修飾，將線形蛋白的N端（含甘氨酸）與C端（含LPXTG）連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，增強抗蛋白酶水解能力，延長半衰期（如細胞因子環(huán)化后穩(wěn)定性顯著提升）。
【產(chǎn)品優(yōu)勢】
I．高純度
本品經(jīng)多步層析純化，純度≥95%，明顯優(yōu)于普通科研級產(chǎn)品（90%），堪比工業(yè)級產(chǎn)品。
II. 高活性
本品經(jīng)突變優(yōu)化，與野生型分選酶A相比，催化活性提高50倍以上、K
cat
/K
m LPETG
(M-1S-1）達2.0×103, K
m GGG
(μM)為4×103。
酶反應(yīng)濃度可低至25 nM，LPETG肽底物濃度可低至12.5 μM，與野生型分選酶A需高濃度酶（>30μM）或長時間反應(yīng)才能達到有效偶聯(lián)相比，本品大幅降低了對酶濃度和反應(yīng)時間的依賴，適用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域偶聯(lián)工藝。
【產(chǎn)品詳情】
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來源
|
大腸桿菌（DE3）
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|
分子量
|
~18kDa
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|
標簽
|
His
|
|
制劑
|
液體，溶劑為1×PBS（PH7.4），50 mM NaCl，0.04% Tween 20，25% Glycerol
|
|
濃度
|
1mg/mL
|
|
純度
|
≥95%（SDS-PAGE）
|
|
SDS-PAGE（12%）
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【儲存條件】
-20℃保存，有效期12個月。
【包裝規(guī)格】
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產(chǎn)品貨號
|
包裝規(guī)格
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|
ECE0720A-50μg
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50μg/支
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|
ECE0720A-100μg
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100μg/支
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ECE0720A-1mg
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1mg/支
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參考文獻
[1] Site-specific C-terminal and internal loop labeling of proteins using sortase-mediated reactions, Nature protocols, 2013,Vol8(9): 1787
【簡介】
分選酶（Sortase）是一類由革蘭氏陽性菌（如金黃色葡萄球菌、鏈球菌等）分泌的轉(zhuǎn)肽酶。它們通過識別特定氨基酸序列，并催化其與細胞壁或細胞膜形成共價連接，從而在細菌的生理活動和致病機制中行使重要功能。我們可以利用上述反應(yīng)活性，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域發(fā)揮重大價值。
本品為Sortase A（SrtA）的突變體，特異性識別LPXTG基序（X為任意氨基酸），切割蘇氨酸（T）和甘氨酸（G）之間的肽鍵，然后將切割后的蛋白羧基端與多聚甘氨酸（通常為GGGGG）受體橋連，完成錨定?；钚暂^野生型有顯著提升。
配圖：
Nature protocols, 2013,Vol8(9): 1787
【應(yīng)用】
I．抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）的定點偶聯(lián)
Sortase A可實現(xiàn)毒素分子與抗體的高精度偶聯(lián)，克服傳統(tǒng)化學(xué)偶聯(lián)導(dǎo)致的產(chǎn)物異質(zhì)性問題，通過識別抗體C端的LPETG序列，將小分子藥物（如毒素或熒光標記）通過寡聚甘氨酸（Gly3-Gly5）連接，生成DAR值均一（通常為2或4） 的ADC，顯著提升藥物穩(wěn)定性和療效。
配圖：
II. 抗菌藥物開發(fā)靶點
作為金黃色葡萄球菌毒力因子，Sortase A可被小分子抑制劑（如丹酚酸A）靶向抑制，降低細菌致病性，用于治療耐藥菌感染（如MRSA肺炎）。
III. 蛋白質(zhì)標記與功能化
比如：位點特異性連接熒光基團（如FITC）、生物素或金屬螯合物，用于蛋白質(zhì)示蹤或檢測。
比如：修飾細胞膜蛋白，實現(xiàn)配體定向展示或細胞功能重編程。
IV. 酶工程/生物催化
比如：酶分子寡聚化，在(S)-羰基還原酶C端添加GGGGSLPETGG序列，經(jīng)Sortase A催化形成多聚體，使比酶活大幅提升，熱穩(wěn)定性增強，并大幅縮短生物轉(zhuǎn)化時間。
比如：環(huán)化修飾，將線形蛋白的N端（含甘氨酸）與C端（含LPXTG）連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，增強抗蛋白酶水解能力，延長半衰期（如細胞因子環(huán)化后穩(wěn)定性顯著提升）。
【產(chǎn)品優(yōu)勢】
I．高純度
本品經(jīng)多步層析純化，純度≥95%，明顯優(yōu)于普通科研級產(chǎn)品（90%），堪比工業(yè)級產(chǎn)品。
II. 高活性
本品經(jīng)突變優(yōu)化，與野生型分選酶A相比，催化活性提高50倍以上、K
cat
/K
m LPETG
(M-1S-1）達2.0×103, K
m GGG
(μM)為4×103。
酶反應(yīng)濃度可低至25 nM，LPETG肽底物濃度可低至12.5 μM，與野生型分選酶A需高濃度酶（>30μM）或長時間反應(yīng)才能達到有效偶聯(lián)相比，本品大幅降低了對酶濃度和反應(yīng)時間的依賴，適用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域偶聯(lián)工藝。
【產(chǎn)品詳情】
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來源
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大腸桿菌（DE3）
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分子量
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~18kDa
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標簽
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His
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制劑
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液體，溶劑為1×PBS（PH7.4），50 mM NaCl，0.04% Tween 20，25% Glycerol
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濃度
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1mg/mL
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純度
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≥95%（SDS-PAGE）
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SDS-PAGE（12%）
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【儲存條件】
-20℃保存，有效期12個月。
【包裝規(guī)格】
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產(chǎn)品貨號
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包裝規(guī)格
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ECE0720A-50μg
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50μg/支
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ECE0720A-100μg
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100μg/支
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ECE0720A-1mg
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1mg/支
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