在蛋白質(zhì)電泳實驗中，考馬斯亮藍(lán)染色法因其操作簡單、成本低廉而廣受歡迎。然而，傳統(tǒng)染色后的脫色步驟耗時費力，往往需要多次更換脫色液并長時間振蕩，嚴(yán)重影響實驗效率。更令人頭疼的是，脫色過程中甲醇等有機(jī)溶劑的使用不僅對實驗人員健康構(gòu)成威脅，還可能因操作不當(dāng)導(dǎo)致蛋白條帶丟失或背景不清。統(tǒng)PAGE凝膠染色液中使用的甲醇和乙酸，對人體有毒害且具有刺激性氣味。

 

圖：WB實驗過程中

針對這一試驗痛點。西寶生物經(jīng)過潛心開發(fā)，終于找到突破性解決方案，開發(fā)出免脫色考馬斯亮藍(lán)快速染色液。通過創(chuàng)新配方設(shè)計，專門設(shè)計用于變性或非變性聚丙烯酰胺電泳（Polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE）相關(guān)的凝膠染色使用，染料為考馬斯亮藍(lán)G250。可直接染色PAGE膠，無需脫色。染色快速、高效。

染色效果驗證： 浸泡10min即可檢測到100ng條帶；30min可檢測到50ng條帶；經(jīng)優(yōu)化后可以檢測到20ng條帶。本品不含傳統(tǒng)PAGE凝膠染色液中使用的甲醇和乙酸，對人體無毒害、無刺激性氣味。

1. 進(jìn)行聚丙烯酰胺電泳使蛋白在凝膠中分離；

2. 電泳結(jié)束后，將凝膠從電泳裝置中取出，用去離子水快速漂洗凝膠（若需高靈敏度染色，可清洗3次，每次5min）；

3. 在清洗好的凝膠中加入適量本染色液（以完全浸沒凝膠為準(zhǔn)），在室溫下染色10~30min，直至目標(biāo)蛋白條能清晰可見，棄染色液；

4. 用適量的去離子水洗去殘留的染色液，停止染色反應(yīng)，隨后可進(jìn)行拍照記錄。

①染色快速、高效、簡便、重復(fù)性好，無需脫色即可實現(xiàn)低背景染色；

②不含甲醇、乙酸等，對人體無毒害、無刺激性氣味；

③組分明確，不影響樣本后續(xù)質(zhì)譜分析試驗；

④線性優(yōu)良，在低蛋白量范圍呈線性劑量響應(yīng)。

圖：通過測定不同濃度的BSA快速染色結(jié)果（左圖為seebio品牌、右圖為B*品牌）