工具酶是細(xì)胞蛋白提取實(shí)驗(yàn)中的"分子手術(shù)刀"，通過(guò)精準(zhǔn)切割特定化學(xué)鍵來(lái)執(zhí)行復(fù)雜任務(wù)。其核心職能貫穿提取全過(guò)程：首先是高效裂解，通過(guò)水解細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的特殊組分；其次添加蛋白酶抑制劑等，迅速中和內(nèi)源性蛋白酶活性，為核心目標(biāo)蛋白的完整性和生物活性提供保護(hù)；最后是清除雜質(zhì)，尤其是降解大量釋放的基因組DNA和RNA，解決樣品粘稠難題。
工具酶的選擇與配伍應(yīng)用，是決定最終提取產(chǎn)物的得率、純度與功能性三大關(guān)鍵指標(biāo)的基礎(chǔ)。
細(xì)胞蛋白提取流程
根據(jù)功能特性與作用目標(biāo)，常用的工具酶可分為三大類別：
細(xì)胞裂解輔助類酶（如重組胰蛋白酶、蛋白酶K），通過(guò)降解細(xì)胞壁或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，促進(jìn)胞內(nèi)蛋白釋放；
蛋白降解抑制類酶（如蛋白酶抑制劑混合物、磷酸酶抑制劑），有效阻斷內(nèi)源性蛋白酶及磷酸酶對(duì)目標(biāo)蛋白的降解或修飾；
核酸雜質(zhì)清除類酶（如DNase I、RNase A），選擇性水解核酸，減少提取過(guò)程中基因組DNA或RNA對(duì)蛋白樣品的干擾，提升蛋白純度。
西寶生物科技在細(xì)胞蛋白提取領(lǐng)域，憑借其深厚的酶學(xué)技術(shù)與創(chuàng)新理念，致力于為科研及產(chǎn)業(yè)人員提供高效、穩(wěn)定、可靠的整體解決方案。擁有先進(jìn)的酶分子改造與蛋白質(zhì)表達(dá)平臺(tái)，關(guān)鍵工具酶實(shí)現(xiàn)自主研發(fā)與生產(chǎn)，從源頭確保產(chǎn)品活性、純度與批間一致性，為您提供穩(wěn)定可靠的質(zhì)量保障。不僅是試劑供應(yīng)商，更是您的技術(shù)合作伙伴。西寶提供覆蓋從細(xì)胞預(yù)處理到核酸去除的全流程一體化解決方案。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 主要用途 |
重組胰蛋白酶 | DCE0060R | 細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)酶解；替代動(dòng)物源性胰蛋白酶 |
RNase A | ECE0201A | 清除實(shí)驗(yàn)環(huán)境 RNA 污染；質(zhì)粒 DNA 制備中去除 RNA |
蛋白酶 K | EBY0027N | 核酸提?。缁詈怂崦福?、去除組蛋白；耐 SDS 和 EDTA |
重組胰蛋白酶（Recombinant Trypsin）
溫和高效的細(xì)胞消化酶，替代動(dòng)物源胰蛋白酶，減少細(xì)胞損傷和污染風(fēng)險(xiǎn)。用于：
原代細(xì)胞或干細(xì)胞培養(yǎng)的傳代。
組織解離（如脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離）。
無(wú)血清培養(yǎng)體系（xenofree 條件）。
步驟
濃度：0.05%-0.25%（如 0.1% 常用）。
溫度與時(shí)間：37°C 孵育 3-5 分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓后終止。
終止方法：加入含血清的培養(yǎng)基或胰蛋白酶抑制劑。
RNase A 在 RNA 提取中的應(yīng)用
核糖核酸酶，特異性降解 RNA，用于：
DNA 提取中去除 RNA 污染。
RNA 蛋白復(fù)合物（如 CLIP 實(shí)驗(yàn)）中釋放 RNA。
組織或細(xì)胞樣本中 RNA 的徹底清除。
步驟
濃度：20-100 μg/mL（如 50 μg/mL 常用）。
溫度與時(shí)間：37°C 孵育 15-30 分鐘。
蛋白酶 K（Proteinase K）
強(qiáng)力廣譜蛋白酶，可消化多種蛋白質(zhì)，常用于去除樣本中的蛋白污染（如 DNA/RNA 提取中），
以及組織或細(xì)胞裂解液中蛋白質(zhì)的降解。
步驟
濃度：通常使用 50-100 μg/mL 工作濃度。
溫度與時(shí)間：56°C 孵育 1-2 小時(shí)（或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整）。
終止反應(yīng)：65°C 加熱 10-20 分鐘或加入 EDTA 終止。
2. 蛋白提取與純化酶
產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
蛋白酶抑制劑混合物（廣譜型） | 通用型，抑制絲氨酸 / 半胱氨酸 / 金屬蛋白酶等 | 含 Aprotinin、Bestatin 等，質(zhì)譜兼容，防止蛋白降解 | |
磷酸酶抑制劑混合物 | 抑制堿性磷酸酶、PP1/PP2A 等 | 含斑蝥素、微囊藻毒素，維持磷酸化狀態(tài) | |
溶菌酶 | ECE0057F | 水解細(xì)菌細(xì)胞壁（革蘭氏陽(yáng)性菌） | 雞蛋清提取，用于細(xì)菌裂解 |
全能核酸酶 | ECE1160A | 降解 DNA/RNA，去除核酸污染 | 適配高鹽環(huán)境 |
蛋白酶抑制劑混合物（廣譜型）
抑制多種蛋白酶活性，防止蛋白質(zhì)在提取過(guò)程中被降解
準(zhǔn)備：將蛋白酶抑制劑混合物從-20°C取出，置于冰上融化
添加：按1:100比例添加到細(xì)胞裂解緩沖液中（如1ml裂解液加10μl抑制劑混合物）
混勻：輕輕顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡
立即使用：配制后立即用于細(xì)胞裂解，不宜長(zhǎng)時(shí)間放置
磷酸酶抑制劑混合物
準(zhǔn)備：將磷酸酶抑制劑混合物從-20°C取出，置于冰上
添加：按1:100比例添加到預(yù)冷的細(xì)胞裂解緩沖液中
混勻：輕輕渦旋混勻
預(yù)冷：將含有抑制劑的裂解液預(yù)冷至4°C
溶菌酶
裂解細(xì)菌細(xì)胞壁，釋放細(xì)胞內(nèi)含物。
工作濃度：0.1-1mg/ml（根據(jù)細(xì)菌種類調(diào)整）
步驟
準(zhǔn)備：將溶菌酶儲(chǔ)存液在冰上融化
添加：按需要濃度添加到細(xì)菌懸液中
孵育：37°C孵育30-60分鐘，或4°C過(guò)夜
觀察：觀察菌液是否變清，表明細(xì)胞壁已裂解
全能核酸酶
降解所有類型的核酸（DNA和RNA），減少核酸污染。
工作濃度：5-50U/ml
步驟
準(zhǔn)備：將全能核酸酶儲(chǔ)存液在冰上融化
添加：按需要濃度添加到樣品中
孵育：37°C孵育15-30分鐘
終止：65°C孵育10分鐘終止反應(yīng)。
3. 蛋白修飾酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
凝血酶 | ECE0616E | 切割 His/GST 標(biāo)簽 | 特異性識(shí)別 PR/K 序列，37℃切割 |
腸激酶 | ECE1123A | 切除融合蛋白標(biāo)簽Asp-Asp-Asp-Asp-Lys | 高特異性，4-45℃適用 |
SUMO蛋白酶 | EAE0087A | 切除 SUMO 標(biāo)簽x-Gly-Gly-x | 識(shí)別 SUMO 三級(jí)結(jié)構(gòu)，4-30℃適用 |
重組 TEV 蛋白酶 | EBY3644A | 切除融合蛋白上7氨基酸序列 EXXYXQ↓(G/S)，切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸 / 絲氨酸之間 | 較 EK、SUMO 等蛋白酶的位點(diǎn)專一性更強(qiáng)，具有高活性和高特異性 |
凝血酶（Thrombin）
作用機(jī)制：凝血酶是一種絲氨酸蛋白酶，能夠特異性識(shí)別并切割精氨酸-甘氨酸肽鍵（Arg-Gly），常用于蛋白純化過(guò)程中的標(biāo)簽去除。
步驟
緩沖條件：通常在生理pH（7.4-8.0）下進(jìn)行，含Ca2?或Mg2?離子
溫度：37°C
反應(yīng)時(shí)間：根據(jù)底物濃度和酶活性，通常為1-4小時(shí)
終止方法：加入蛋白酶抑制劑或加熱至95°C
腸激酶（Enterokinase）
作用機(jī)制：腸激酶輕鏈能夠特異性識(shí)別并切割A(yù)sp-Asp-Asp-Asp-Lys序列，產(chǎn)生天然N-末端
步驟
酶濃度：通常使用0.5-1 U/μg融合蛋白
尿素濃度：0-3M（可提高切割效率）
反應(yīng)緩沖液：20mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 2mM CaCl?, pH 7.5
反應(yīng)溫度：25-37°C
反應(yīng)時(shí)間：過(guò)夜（16-18小時(shí)）
純化步驟：切割后可通過(guò)Ni-NTA親和層析去除His標(biāo)簽
SUMO 蛋白酶（SUMO Protease）
作用機(jī)制：SUMO蛋白酶（如Ulp1）特異性識(shí)別SUMO蛋白與目標(biāo)蛋白之間的連接肽鍵，切割后產(chǎn)生天然N-末端
步驟
緩沖液：50mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 1mM EDTA, pH 8.0
溫度：4°C或室溫
酶用量：通常為1:50至1:100（酶:底物摩爾比）
反應(yīng)時(shí)間：2-16小時(shí)
優(yōu)勢(shì)：切割后無(wú)額外氨基酸殘留，保持蛋白質(zhì)天然狀態(tài)
重組TEV蛋白酶（rTEV Protease）
作用機(jī)制：TEV蛋白酶特異性識(shí)別并切割Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓Gly序列，產(chǎn)生天然N-末端
步驟
緩沖液：50mM Tris-HCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, pH 8.0
溫度：4°C或室溫
酶用量：通常為1:20至1:50（酶:底物摩爾比）
反應(yīng)時(shí)間：2-16小時(shí)
應(yīng)用：廣泛用于融合蛋白的標(biāo)簽去除，具有高特異性和溫和的切割條件
4 糖基化分析工具酶
糖苷酶 | 名稱 | 貨號(hào) | 酶切位點(diǎn) | 特點(diǎn) |
唾液酸修飾 | 唾液酸酶 (a2-3,6,8) | DCE0457E-10KU | 糖蛋白和寡聚糖上通過(guò) a2-3、a2-6、a2-8 鍵連接的唾液酸 | 可同時(shí)作用于 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸和 N-乙酰神經(jīng)氨酸 |
唾液酸修飾 | 唾液酸酶 (a2-3,6,8,9) | DCE0457E-10KU | 糖蛋白和寡聚糖上通過(guò) a2-3、a2-6、a2-8 和 a2-9 鍵連接的唾液酸 | 可同時(shí)作用于 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸和 N-乙酰神經(jīng)氨酸；可忍受 0.5%-1.0% 的去污劑 |
N-糖基化修飾 | PNGase F | ECE0441C | 天冬酰胺和最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc（N-乙酰葡糖胺）之間的糖苷鍵 | 適用于抗體和糖蛋白的 N-糖基完全去除；可在變性與非變性條件下切割糖蛋白 |
N-糖基化修飾 | 重組 Endo H | DCE0447C | N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心結(jié)構(gòu) | 適用于抗體或其它糖蛋白的 N-連接高甘露糖的完全去除；存儲(chǔ)液中不含甘油 |
O-糖基化修飾 | O 糖蛋白酶 | 粘蛋白型 O-連接糖（無(wú)論是否唾液酸化）的絲氨酸或蘇氨酸殘基 | 適用于 O-糖基化分析；無(wú)需唾液酸酶預(yù)先處理 |
5. 蛋白檢測(cè)酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
辣根過(guò)氧化物酶（HRP） | ECE0066R | WB（免疫印跡）/ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）檢測(cè) | 催化TMB 顯色，分子量 44kDa |
堿性磷酸酶 | DCE0108L | WB / 去磷酸化 | 需 Zn2?/Mg2?激活，用于 DNA 去磷酸化 |
β-半乳糖苷酶 | 報(bào)告基因內(nèi)參 | 催化 ONPG 生成黃色產(chǎn)物，420nm 波長(zhǎng)下檢測(cè) | |
賴氨酰內(nèi)切酶 | EXK0369C | 質(zhì)譜級(jí)蛋白消化 | 特異性切割賴氨酸羧基端 |
6. 相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
鹽酸胍 | ACH0011F |
二硫蘇糖醇（DTT） | DDCH0005O |
碘乙酸 | |
三羥甲基氨基甲烷（結(jié)晶）(Tris base) | ACC0030B |
三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽 (TRIS-HCl) | ACC0029A |
工具酶是細(xì)胞蛋白提取實(shí)驗(yàn)中的"分子手術(shù)刀"，通過(guò)精準(zhǔn)切割特定化學(xué)鍵來(lái)執(zhí)行復(fù)雜任務(wù)。其核心職能貫穿提取全過(guò)程：首先是高效裂解，通過(guò)水解細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的特殊組分；其次添加蛋白酶抑制劑等，迅速中和內(nèi)源性蛋白酶活性，為核心目標(biāo)蛋白的完整性和生物活性提供保護(hù)；最后是清除雜質(zhì)，尤其是降解大量釋放的基因組DNA和RNA，解決樣品粘稠難題。
工具酶的選擇與配伍應(yīng)用，是決定最終提取產(chǎn)物的得率、純度與功能性三大關(guān)鍵指標(biāo)的基礎(chǔ)。
細(xì)胞蛋白提取流程
根據(jù)功能特性與作用目標(biāo)，常用的工具酶可分為三大類別：
細(xì)胞裂解輔助類酶（如重組胰蛋白酶、蛋白酶K），通過(guò)降解細(xì)胞壁或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，促進(jìn)胞內(nèi)蛋白釋放；
蛋白降解抑制類酶（如蛋白酶抑制劑混合物、磷酸酶抑制劑），有效阻斷內(nèi)源性蛋白酶及磷酸酶對(duì)目標(biāo)蛋白的降解或修飾；
核酸雜質(zhì)清除類酶（如DNase I、RNase A），選擇性水解核酸，減少提取過(guò)程中基因組DNA或RNA對(duì)蛋白樣品的干擾，提升蛋白純度。
西寶生物科技在細(xì)胞蛋白提取領(lǐng)域，憑借其深厚的酶學(xué)技術(shù)與創(chuàng)新理念，致力于為科研及產(chǎn)業(yè)人員提供高效、穩(wěn)定、可靠的整體解決方案。擁有先進(jìn)的酶分子改造與蛋白質(zhì)表達(dá)平臺(tái)，關(guān)鍵工具酶實(shí)現(xiàn)自主研發(fā)與生產(chǎn)，從源頭確保產(chǎn)品活性、純度與批間一致性，為您提供穩(wěn)定可靠的質(zhì)量保障。不僅是試劑供應(yīng)商，更是您的技術(shù)合作伙伴。西寶提供覆蓋從細(xì)胞預(yù)處理到核酸去除的全流程一體化解決方案。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 主要用途 |
重組胰蛋白酶 | DCE0060R | 細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)酶解；替代動(dòng)物源性胰蛋白酶 |
RNase A | ECE0201A | 清除實(shí)驗(yàn)環(huán)境 RNA 污染；質(zhì)粒 DNA 制備中去除 RNA |
蛋白酶 K | EBY0027N | 核酸提?。缁詈怂崦福?、去除組蛋白；耐 SDS 和 EDTA |
重組胰蛋白酶（Recombinant Trypsin）
溫和高效的細(xì)胞消化酶，替代動(dòng)物源胰蛋白酶，減少細(xì)胞損傷和污染風(fēng)險(xiǎn)。用于：
原代細(xì)胞或干細(xì)胞培養(yǎng)的傳代。
組織解離（如脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離）。
無(wú)血清培養(yǎng)體系（xenofree 條件）。
步驟
濃度：0.05%-0.25%（如 0.1% 常用）。
溫度與時(shí)間：37°C 孵育 3-5 分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓后終止。
終止方法：加入含血清的培養(yǎng)基或胰蛋白酶抑制劑。
RNase A 在 RNA 提取中的應(yīng)用
核糖核酸酶，特異性降解 RNA，用于：
DNA 提取中去除 RNA 污染。
RNA 蛋白復(fù)合物（如 CLIP 實(shí)驗(yàn)）中釋放 RNA。
組織或細(xì)胞樣本中 RNA 的徹底清除。
步驟
濃度：20-100 μg/mL（如 50 μg/mL 常用）。
溫度與時(shí)間：37°C 孵育 15-30 分鐘。
蛋白酶 K（Proteinase K）
強(qiáng)力廣譜蛋白酶，可消化多種蛋白質(zhì)，常用于去除樣本中的蛋白污染（如 DNA/RNA 提取中），
以及組織或細(xì)胞裂解液中蛋白質(zhì)的降解。
步驟
濃度：通常使用 50-100 μg/mL 工作濃度。
溫度與時(shí)間：56°C 孵育 1-2 小時(shí)（或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整）。
終止反應(yīng)：65°C 加熱 10-20 分鐘或加入 EDTA 終止。
2. 蛋白提取與純化酶
產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
蛋白酶抑制劑混合物（廣譜型） | 通用型，抑制絲氨酸 / 半胱氨酸 / 金屬蛋白酶等 | 含 Aprotinin、Bestatin 等，質(zhì)譜兼容，防止蛋白降解 | |
磷酸酶抑制劑混合物 | 抑制堿性磷酸酶、PP1/PP2A 等 | 含斑蝥素、微囊藻毒素，維持磷酸化狀態(tài) | |
溶菌酶 | ECE0057F | 水解細(xì)菌細(xì)胞壁（革蘭氏陽(yáng)性菌） | 雞蛋清提取，用于細(xì)菌裂解 |
全能核酸酶 | ECE1160A | 降解 DNA/RNA，去除核酸污染 | 適配高鹽環(huán)境 |
蛋白酶抑制劑混合物（廣譜型）
抑制多種蛋白酶活性，防止蛋白質(zhì)在提取過(guò)程中被降解
準(zhǔn)備：將蛋白酶抑制劑混合物從-20°C取出，置于冰上融化
添加：按1:100比例添加到細(xì)胞裂解緩沖液中（如1ml裂解液加10μl抑制劑混合物）
混勻：輕輕顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡
立即使用：配制后立即用于細(xì)胞裂解，不宜長(zhǎng)時(shí)間放置
磷酸酶抑制劑混合物
準(zhǔn)備：將磷酸酶抑制劑混合物從-20°C取出，置于冰上
添加：按1:100比例添加到預(yù)冷的細(xì)胞裂解緩沖液中
混勻：輕輕渦旋混勻
預(yù)冷：將含有抑制劑的裂解液預(yù)冷至4°C
溶菌酶
裂解細(xì)菌細(xì)胞壁，釋放細(xì)胞內(nèi)含物。
工作濃度：0.1-1mg/ml（根據(jù)細(xì)菌種類調(diào)整）
步驟
準(zhǔn)備：將溶菌酶儲(chǔ)存液在冰上融化
添加：按需要濃度添加到細(xì)菌懸液中
孵育：37°C孵育30-60分鐘，或4°C過(guò)夜
觀察：觀察菌液是否變清，表明細(xì)胞壁已裂解
全能核酸酶
降解所有類型的核酸（DNA和RNA），減少核酸污染。
工作濃度：5-50U/ml
步驟
準(zhǔn)備：將全能核酸酶儲(chǔ)存液在冰上融化
添加：按需要濃度添加到樣品中
孵育：37°C孵育15-30分鐘
終止：65°C孵育10分鐘終止反應(yīng)。
3. 蛋白修飾酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
凝血酶 | ECE0616E | 切割 His/GST 標(biāo)簽 | 特異性識(shí)別 PR/K 序列，37℃切割 |
腸激酶 | ECE1123A | 切除融合蛋白標(biāo)簽Asp-Asp-Asp-Asp-Lys | 高特異性，4-45℃適用 |
SUMO蛋白酶 | EAE0087A | 切除 SUMO 標(biāo)簽x-Gly-Gly-x | 識(shí)別 SUMO 三級(jí)結(jié)構(gòu)，4-30℃適用 |
重組 TEV 蛋白酶 | EBY3644A | 切除融合蛋白上7氨基酸序列 EXXYXQ↓(G/S)，切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸 / 絲氨酸之間 | 較 EK、SUMO 等蛋白酶的位點(diǎn)專一性更強(qiáng)，具有高活性和高特異性 |
凝血酶（Thrombin）
作用機(jī)制：凝血酶是一種絲氨酸蛋白酶，能夠特異性識(shí)別并切割精氨酸-甘氨酸肽鍵（Arg-Gly），常用于蛋白純化過(guò)程中的標(biāo)簽去除。
步驟
緩沖條件：通常在生理pH（7.4-8.0）下進(jìn)行，含Ca2?或Mg2?離子
溫度：37°C
反應(yīng)時(shí)間：根據(jù)底物濃度和酶活性，通常為1-4小時(shí)
終止方法：加入蛋白酶抑制劑或加熱至95°C
腸激酶（Enterokinase）
作用機(jī)制：腸激酶輕鏈能夠特異性識(shí)別并切割A(yù)sp-Asp-Asp-Asp-Lys序列，產(chǎn)生天然N-末端
步驟
酶濃度：通常使用0.5-1 U/μg融合蛋白
尿素濃度：0-3M（可提高切割效率）
反應(yīng)緩沖液：20mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 2mM CaCl?, pH 7.5
反應(yīng)溫度：25-37°C
反應(yīng)時(shí)間：過(guò)夜（16-18小時(shí)）
純化步驟：切割后可通過(guò)Ni-NTA親和層析去除His標(biāo)簽
SUMO 蛋白酶（SUMO Protease）
作用機(jī)制：SUMO蛋白酶（如Ulp1）特異性識(shí)別SUMO蛋白與目標(biāo)蛋白之間的連接肽鍵，切割后產(chǎn)生天然N-末端
步驟
緩沖液：50mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 1mM EDTA, pH 8.0
溫度：4°C或室溫
酶用量：通常為1:50至1:100（酶:底物摩爾比）
反應(yīng)時(shí)間：2-16小時(shí)
優(yōu)勢(shì)：切割后無(wú)額外氨基酸殘留，保持蛋白質(zhì)天然狀態(tài)
重組TEV蛋白酶（rTEV Protease）
作用機(jī)制：TEV蛋白酶特異性識(shí)別并切割Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓Gly序列，產(chǎn)生天然N-末端
步驟
緩沖液：50mM Tris-HCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, pH 8.0
溫度：4°C或室溫
酶用量：通常為1:20至1:50（酶:底物摩爾比）
反應(yīng)時(shí)間：2-16小時(shí)
應(yīng)用：廣泛用于融合蛋白的標(biāo)簽去除，具有高特異性和溫和的切割條件
4 糖基化分析工具酶
糖苷酶 | 名稱 | 貨號(hào) | 酶切位點(diǎn) | 特點(diǎn) |
唾液酸修飾 | 唾液酸酶 (a2-3,6,8) | DCE0457E-10KU | 糖蛋白和寡聚糖上通過(guò) a2-3、a2-6、a2-8 鍵連接的唾液酸 | 可同時(shí)作用于 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸和 N-乙酰神經(jīng)氨酸 |
唾液酸修飾 | 唾液酸酶 (a2-3,6,8,9) | DCE0457E-10KU | 糖蛋白和寡聚糖上通過(guò) a2-3、a2-6、a2-8 和 a2-9 鍵連接的唾液酸 | 可同時(shí)作用于 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸和 N-乙酰神經(jīng)氨酸；可忍受 0.5%-1.0% 的去污劑 |
N-糖基化修飾 | PNGase F | ECE0441C | 天冬酰胺和最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc（N-乙酰葡糖胺）之間的糖苷鍵 | 適用于抗體和糖蛋白的 N-糖基完全去除；可在變性與非變性條件下切割糖蛋白 |
N-糖基化修飾 | 重組 Endo H | DCE0447C | N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心結(jié)構(gòu) | 適用于抗體或其它糖蛋白的 N-連接高甘露糖的完全去除；存儲(chǔ)液中不含甘油 |
O-糖基化修飾 | O 糖蛋白酶 | 粘蛋白型 O-連接糖（無(wú)論是否唾液酸化）的絲氨酸或蘇氨酸殘基 | 適用于 O-糖基化分析；無(wú)需唾液酸酶預(yù)先處理 |
5. 蛋白檢測(cè)酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 類型 / 用途 | 特點(diǎn) |
辣根過(guò)氧化物酶（HRP） | ECE0066R | WB（免疫印跡）/ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）檢測(cè) | 催化TMB 顯色，分子量 44kDa |
堿性磷酸酶 | DCE0108L | WB / 去磷酸化 | 需 Zn2?/Mg2?激活，用于 DNA 去磷酸化 |
β-半乳糖苷酶 | 報(bào)告基因內(nèi)參 | 催化 ONPG 生成黃色產(chǎn)物，420nm 波長(zhǎng)下檢測(cè) | |
賴氨酰內(nèi)切酶 | EXK0369C | 質(zhì)譜級(jí)蛋白消化 | 特異性切割賴氨酸羧基端 |
6. 相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
鹽酸胍 | ACH0011F |
二硫蘇糖醇（DTT） | DDCH0005O |
碘乙酸 | |
三羥甲基氨基甲烷（結(jié)晶）(Tris base) | ACC0030B |
三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽 (TRIS-HCl) | ACC0029A |
