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藻紅蛋白(R-Phycoerythrin, R-PE)——新型熒光標(biāo)記染料


  專題推薦     |      2021-07-30
藻紅蛋白(R-Phycoerythrin, R-PE)是從紅藻中分離純化的一種熒光蛋白,是一種新型熒光標(biāo)記染料。因?yàn)槠渚哂袕?qiáng)烈的熒光,很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍,所以在免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)等抗體的熒光標(biāo)記和活體成像中有著廣泛的應(yīng)用。西寶生物可提供藻紅蛋白,穩(wěn)定性好,靈敏度高,不易淬滅,咨詢熱線400-021-8158!
產(chǎn)品性質(zhì)
分子量: 約 170,000 道爾頓
純度: Amax/A280 > 5.5
熒光發(fā)射峰: 575±5 nm
結(jié)構(gòu): 分子結(jié)構(gòu)為通過(guò)硫醚鍵連接的載體蛋白與開鏈線性延展的四咯化合物。
藻紅蛋白(R-PE)結(jié)構(gòu)式
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、在較寬的PH范圍內(nèi)具有較寬的吸收光譜,比較容易選擇合適的激發(fā)波長(zhǎng),從而得到熒光發(fā)射,且激發(fā)時(shí)有特異的熒光發(fā)射峰;
2、吸光度和熒光量子產(chǎn)率很高,熒光強(qiáng)而穩(wěn)定,靈敏度高;
3、具有較小的熒光背景,不易淬滅,熒光保存期較長(zhǎng);
4、水溶性佳,易與其他分子交聯(lián)結(jié)合,非特異性吸附少;
5、海洋生物提取,無(wú)毒副作用,不含放射性,操作使用很安全。易與抗體、生物素、親合素、免疫蛋白等物質(zhì)結(jié)合,制成熒光探針。
應(yīng)用領(lǐng)域
作為熒光探針標(biāo)記抗體,生物素和鏈霉親和素或其他蛋白,用于免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)及活體成像實(shí)驗(yàn)。
藻紅蛋白(R-PE)標(biāo)記抗體的步驟
1、藻紅蛋白的預(yù)處理
藻紅蛋白凍干粉用純化水溶解,濃度調(diào)整到 5-10 毫克/毫升為宜。
2、藻紅蛋白的衍生化
將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無(wú)水二甲基亞砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻紅蛋白添加11微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1- 碳酸酯)(SMCC),鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應(yīng)生成衍生化的藻紅蛋白。
交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠層析柱,將衍生化的藻紅蛋白過(guò)柱,收集藻紅蛋白峰。
3、抗體的處理
二硫蘇糖醇(DTT)溶解于蒸餾水中,配制成1摩爾/升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,調(diào)整抗體的濃度,使其濃度不低于為4毫克/毫升。
每毫升抗體溶液中加入20微升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,室溫靜置反應(yīng)40分鐘,將抗體的二硫鍵打開形成巰基。
交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠柱,將反應(yīng)液過(guò)柱,收集抗體部分。
4、藻紅蛋白和抗體的共價(jià)交聯(lián)
每毫克抗體加入3.2毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅 蛋白,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,使藻紅蛋白分子上的馬來(lái)酰亞胺基和抗體上的巰基實(shí)現(xiàn)共價(jià)交聯(lián)。
10毫克的N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)溶解于1.0毫升的無(wú)水二甲基亞砜(DMSO)中制成N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)母液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。
每毫克抗體中加入3.4微升N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)母液,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,反應(yīng)后,使抗體上的巰基封閉。
5、交聯(lián)物的存儲(chǔ)
將交聯(lián)物于存儲(chǔ)緩沖液中透析后保存于2-8℃。
產(chǎn)品列表
貨號(hào)產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
DCD0488A藻紅蛋白(R-PE)晶體

5mg
10mg

DCD0488B藻紅蛋白(R-PE)沉淀5mg
10mg
DCD0488C藻紅蛋白(R-PE)凍干粉5mg
10mg
運(yùn)輸與保存
藻紅蛋白晶體為常溫運(yùn)輸,4℃保存,效期 4 年以上;藻紅蛋白沉淀為冰袋運(yùn)輸,4℃保存,效期1 年。
以上藻紅蛋白產(chǎn)品可定制大包裝,詳情咨詢西寶生物400-021-8158!或者聯(lián)系我司診斷疫苗團(tuán)隊(duì)。
藻紅蛋白(R-Phycoerythrin, R-PE)是從紅藻中分離純化的一種熒光蛋白,是一種新型熒光標(biāo)記染料。因?yàn)槠渚哂袕?qiáng)烈的熒光,很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍,所以在免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)等抗體的熒光標(biāo)記和活體成像中有著廣泛的應(yīng)用。西寶生物可提供藻紅蛋白,穩(wěn)定性好,靈敏度高,不易淬滅,咨詢熱線400-021-8158!
產(chǎn)品性質(zhì)
分子量: 約 170,000 道爾頓
純度: Amax/A280 > 5.5
熒光發(fā)射峰: 575±5 nm
結(jié)構(gòu): 分子結(jié)構(gòu)為通過(guò)硫醚鍵連接的載體蛋白與開鏈線性延展的四咯化合物。
藻紅蛋白(R-PE)結(jié)構(gòu)式
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、在較寬的PH范圍內(nèi)具有較寬的吸收光譜,比較容易選擇合適的激發(fā)波長(zhǎng),從而得到熒光發(fā)射,且激發(fā)時(shí)有特異的熒光發(fā)射峰;
2、吸光度和熒光量子產(chǎn)率很高,熒光強(qiáng)而穩(wěn)定,靈敏度高;
3、具有較小的熒光背景,不易淬滅,熒光保存期較長(zhǎng);
4、水溶性佳,易與其他分子交聯(lián)結(jié)合,非特異性吸附少;
5、海洋生物提取,無(wú)毒副作用,不含放射性,操作使用安全。易與抗體、生物素、親合素、免疫蛋白等物質(zhì)結(jié)合,制成熒光探針。
應(yīng)用領(lǐng)域
作為熒光探針標(biāo)記抗體,生物素和鏈霉親和素或其他蛋白,用于免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)及活體成像實(shí)驗(yàn)。
藻紅蛋白(R-PE)標(biāo)記抗體的步驟
1、藻紅蛋白的預(yù)處理
藻紅蛋白凍干粉用純化水溶解,濃度調(diào)整到 5-10 毫克/毫升為宜。
2、藻紅蛋白的衍生化
將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無(wú)水二甲基亞砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻紅蛋白添加11微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1- 碳酸酯)(SMCC),鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應(yīng)生成衍生化的藻紅蛋白。
交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠層析柱,將衍生化的藻紅蛋白過(guò)柱,收集藻紅蛋白峰。
3、抗體的處理
二硫蘇糖醇(DTT)溶解于蒸餾水中,配制成1摩爾/升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,調(diào)整抗體的濃度,使其濃度不低于為4毫克/毫升。
每毫升抗體溶液中加入20微升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,室溫靜置反應(yīng)40分鐘,將抗體的二硫鍵打開形成巰基。
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4、藻紅蛋白和抗體的共價(jià)交聯(lián)
每毫克抗體加入3.2毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅 蛋白,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,使藻紅蛋白分子上的馬來(lái)酰亞胺基和抗體上的巰基實(shí)現(xiàn)共價(jià)交聯(lián)。
10毫克的N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)溶解于1.0毫升的無(wú)水二甲基亞砜(DMSO)中制成N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)母液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。
每毫克抗體中加入3.4微升N-乙基馬來(lái)酰胺(NEM)母液,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘,反應(yīng)后,使抗體上的巰基封閉。
5、交聯(lián)物的存儲(chǔ)
將交聯(lián)物于存儲(chǔ)緩沖液中透析后保存于2-8℃。
產(chǎn)品列表
貨號(hào)產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
DCD0488A藻紅蛋白(R-PE)晶體

5mg
10mg

DCD0488B藻紅蛋白(R-PE)沉淀5mg
10mg
DCD0488C藻紅蛋白(R-PE)凍干粉5mg
10mg
運(yùn)輸與保存
藻紅蛋白晶體為常溫運(yùn)輸,4℃保存,效期4 年以上;藻紅蛋白沉淀為冰袋運(yùn)輸,4℃保存,效期1 年。
以上藻紅蛋白產(chǎn)品可定制大包裝,詳情咨詢西寶生物400-021-8158!或者聯(lián)系我司診斷疫苗團(tuán)隊(duì)。