1.項(xiàng)目背景
摘自《高同型半胱氨酸血癥的診斷、治療與預(yù)防專家共識(shí)》
1.1病因及分類(lèi)
同型半胱氨酸是蛋氨酸代謝過(guò)程中的中間產(chǎn)物，主要通過(guò)甲基化及轉(zhuǎn)硫化兩條途徑轉(zhuǎn)化代謝，血液同型半胱氨酸水平受參與蛋氨酸代謝過(guò)程中的各種酶及輔因子(如鈷胺素、維生素B6、葉酸)影響。食物中的葉酸還原為四氫葉酸，在絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶作用下轉(zhuǎn)化為5,10-亞甲基四氫葉酸，并在亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)作用下轉(zhuǎn)化為5-甲基四氫葉酸，提供甲基給同型半胱氨酸，在蛋氨酸合成酶作用下生成蛋氨酸。鈷胺素參與5-甲基四氫葉酸的再甲基化反應(yīng)。蛋氨酸在蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶作用下，被三磷酸腺苷激活形成S-腺苷蛋氨酸，S-腺苷蛋氨酸是體內(nèi)最重要的甲基供體。在轉(zhuǎn)硫途徑中，同型半胱氨酸在胱硫醚β-合成酶作用下轉(zhuǎn)化為胱硫醚，并進(jìn)一步在胱硫醚γ-裂解酶作用下裂解為半胱氨酸和α-酮丁酸。在同型半胱氨酸再甲基化及轉(zhuǎn)硫通路中，任何一個(gè)酶或輔酶缺陷都會(huì)導(dǎo)致高同型半胱氨酸血癥。
遺傳性高同型半胱氨酸血癥分為酶缺陷和輔酶缺陷兩大類(lèi)，酶缺陷以胱硫醚β-合成酶、亞甲基四氫葉酸還原酶、蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶缺陷最為常見(jiàn)，輔酶缺陷以鈷胺素和葉酸代謝障礙最為常見(jiàn)。一些非遺傳性因素也可導(dǎo)致高同型半胱氨酸血癥，如營(yíng)養(yǎng)不良、長(zhǎng)期素食導(dǎo)致的營(yíng)養(yǎng)素缺乏(如葉酸、維生素B6、鈷胺素、甜菜堿缺乏)、衰老、慢性胃腸疾病、肝病、腎病、惡性腫瘤、藥物(如異煙肼、甲氨蝶呤)以及不良生活方式(如長(zhǎng)期吸煙、酗酒等)。
1.2 診斷與鑒別診斷
不同病因?qū)е碌母咄桶腚装彼嵫Y患者體內(nèi)生化代謝異常有所差異，需通過(guò)病史調(diào)查、血液及尿液代謝分析、維生素測(cè)定、基因分析等檢查鑒別診斷。
(1)病史調(diào)查：一般資料、癥狀、體征，調(diào)查個(gè)人史、飲食習(xí)慣、用藥史、家族史。對(duì)于哺乳期嬰兒，需調(diào)查母親的飲食與營(yíng)養(yǎng)狀況及疾病史，以鑒別母親營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致的嬰兒繼發(fā)性高同型半胱氨酸血癥。
(2)血漿或血清總同型半胱氨酸：血液中大部分同型半胱氨酸與蛋白質(zhì)結(jié)合，少數(shù)與同型半胱氨酸自身或半胱氨酸結(jié)合形成混合型同型半胱氨酸二硫化物，推薦檢測(cè)總同型半胱氨酸濃度作為確診高同型半胱氨酸血癥的關(guān)鍵方法。
1.3參考范圍
目前臨床實(shí)驗(yàn)室常用的血清中Hcy的正常參考范圍為5~15μｍol/Ｌ，但不同的共識(shí)或指南也有不同的建議。2020年發(fā)布的《高同型半胱氨酸血癥診療專家共識(shí)》中建議，將成人高血同(血同>10μmol/L)劃分為輕度(10~15μmol/L)中度(15~30μmol/L)和重度(>30μmol/L)。孕婦和兒童屬于特殊人群,宜低于成人參考值。但2022年發(fā)布《高同型半胱氨酸血癥的診斷、治療與預(yù)防專家共識(shí)》根據(jù)血清總同型半胱氨酸的濃度不同，分為輕度(15~30μmol/L)、中度(30~100μmol/L)和重度(>100μmol/L)?！吨袊?guó)高血壓防治指南（2018年修訂版）》中高同型半胱氨酸血癥的定義是Hcy大于等于15μmol/L，但2024版本中刪除了該表述。
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)HCY的檢測(cè)，西寶生物推出4株抗體及1款標(biāo)準(zhǔn)品及1款SAHH酶。具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
組合1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記吖啶酯；
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
組合3：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶；
2.3熒光免疫層析平臺(tái)
組合5：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜；
2.4穩(wěn)定性評(píng)估
2.4.1 各組分工作液穩(wěn)定性
采用SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將磁珠包被的SAH-BSA濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
采用SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將吖啶酯標(biāo)記的SAH抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
采用SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將SAH標(biāo)準(zhǔn)品配制成梯度進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
如表1所示：
a.磁珠包被SAH-BSA工作液?jiǎn)为?dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明磁珠包被SAH-BSA工作液熱穩(wěn)定性良好；
b.吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液?jiǎn)为?dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
c.SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度熱穩(wěn)定性良好。
表1 SAH各組分工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號(hào) | SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度（μmol/L） | 磁珠-包被SAH-BSA工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 | 吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 | SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | -2.5% | 0.1% | 0.4% |
S1 | 1.3 | -5.6% | -2.4% | 1.4% |
S2 | 2.6 | -2.0% | 6.8% | 3.1% |
S3 | 13 | 0.4% | 3.1% | 5.2% |
S4 | 26 | -5.1% | 6.6% | 2.2% |
S5 | 52 | -5.4% | 4.2% | 4.0% |
平均變化 | -3.3% | 3.1% | 2.7% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合1與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90，相關(guān)性良好；
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合2與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90左右，相關(guān)性良好；
3.3熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合3與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90左右，相關(guān)性良好。
4. 測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
SAH原料配對(duì)組合1
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
樣本:樣品加樣量20ul；
試劑1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣本+20ul處理液1（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）混合，37℃孵育5min；
第二步：加入20ul處理液2（含S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合，37℃孵育5min；
第三步：加入50ul試劑1+50ul 試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第四步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
SAH原料配對(duì)組合2
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
樣本:樣品加樣量20ul；
試劑1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣本+20ul處理液1（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）混合，37℃孵育5min；
第二步：加入20ul處理液2（含S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合，37℃孵育5min；
第三步：加入50ul試劑1+50ul 試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第四步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺(tái)
抗體配對(duì)組合3：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
反應(yīng)條件：
50ul樣品+200ul處理液3（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）+S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗 | EKY0169E | SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合2） |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原 | EAS0196E | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗 | DKY0169D | SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜（熒光免疫層析平臺(tái)配對(duì)組合3） |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原 | EAS0196C | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH）標(biāo)準(zhǔn)品 | EAS0196F | 質(zhì)控 |
SAH-BSA抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1380A | |
SAH抗體（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1380B | |
SAH抗體（貨號(hào)：EKY0169E）吖啶酯濃縮液 | DKY1380C | |
SAH抗體（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1380D | |
APS-5發(fā)光底物液（即用型） | ECD0532M | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
羧基磁性微球，1.2um | DEG0800D | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
重組堿性磷酸酶（高活性） | DCE0108L | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（300nm） | AEG0789E | |
SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
SAH吖啶酯稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
Adenosine（腺苷） | ACI0010A | |
DTT（二硫蘇糖醇） | DCH0005D | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH） | ECE1043C |
1.項(xiàng)目背景
摘自《高同型半胱氨酸血癥的診斷、治療與預(yù)防專家共識(shí)》
1.1病因及分類(lèi)
同型半胱氨酸是蛋氨酸代謝過(guò)程中的中間產(chǎn)物，主要通過(guò)甲基化及轉(zhuǎn)硫化兩條途徑轉(zhuǎn)化代謝，血液同型半胱氨酸水平受參與蛋氨酸代謝過(guò)程中的各種酶及輔因子(如鈷胺素、維生素B6、葉酸)影響。食物中的葉酸還原為四氫葉酸，在絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶作用下轉(zhuǎn)化為5,10-亞甲基四氫葉酸，并在亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)作用下轉(zhuǎn)化為5-甲基四氫葉酸，提供甲基給同型半胱氨酸，在蛋氨酸合成酶作用下生成蛋氨酸。鈷胺素參與5-甲基四氫葉酸的再甲基化反應(yīng)。蛋氨酸在蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶作用下，被三磷酸腺苷激活形成S-腺苷蛋氨酸，S-腺苷蛋氨酸是體內(nèi)最重要的甲基供體。在轉(zhuǎn)硫途徑中，同型半胱氨酸在胱硫醚β-合成酶作用下轉(zhuǎn)化為胱硫醚，并進(jìn)一步在胱硫醚γ-裂解酶作用下裂解為半胱氨酸和α-酮丁酸。在同型半胱氨酸再甲基化及轉(zhuǎn)硫通路中，任何一個(gè)酶或輔酶缺陷都會(huì)導(dǎo)致高同型半胱氨酸血癥。
遺傳性高同型半胱氨酸血癥分為酶缺陷和輔酶缺陷兩大類(lèi)，酶缺陷以胱硫醚β-合成酶、亞甲基四氫葉酸還原酶、蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶缺陷最為常見(jiàn)，輔酶缺陷以鈷胺素和葉酸代謝障礙最為常見(jiàn)。一些非遺傳性因素也可導(dǎo)致高同型半胱氨酸血癥，如營(yíng)養(yǎng)不良、長(zhǎng)期素食導(dǎo)致的營(yíng)養(yǎng)素缺乏(如葉酸、維生素B6、鈷胺素、甜菜堿缺乏)、衰老、慢性胃腸疾病、肝病、腎病、惡性腫瘤、藥物(如異煙肼、甲氨蝶呤)以及不良生活方式(如長(zhǎng)期吸煙、酗酒等)。
1.2 診斷與鑒別診斷
不同病因?qū)е碌母咄桶腚装彼嵫Y患者體內(nèi)生化代謝異常有所差異，需通過(guò)病史調(diào)查、血液及尿液代謝分析、維生素測(cè)定、基因分析等檢查鑒別診斷。
(1)病史調(diào)查：一般資料、癥狀、體征，調(diào)查個(gè)人史、飲食習(xí)慣、用藥史、家族史。對(duì)于哺乳期嬰兒，需調(diào)查母親的飲食與營(yíng)養(yǎng)狀況及疾病史，以鑒別母親營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致的嬰兒繼發(fā)性高同型半胱氨酸血癥。
(2)血漿或血清總同型半胱氨酸：血液中大部分同型半胱氨酸與蛋白質(zhì)結(jié)合，少數(shù)與同型半胱氨酸自身或半胱氨酸結(jié)合形成混合型同型半胱氨酸二硫化物，推薦檢測(cè)總同型半胱氨酸濃度作為確診高同型半胱氨酸血癥的關(guān)鍵方法。
1.3參考范圍
目前臨床實(shí)驗(yàn)室常用的血清中Hcy的正常參考范圍為5~15μｍol/Ｌ，但不同的共識(shí)或指南也有不同的建議。2020年發(fā)布的《高同型半胱氨酸血癥診療專家共識(shí)》中建議，將成人高血同(血同>10μmol/L)劃分為輕度(10~15μmol/L)中度(15~30μmol/L)和重度(>30μmol/L)。孕婦和兒童屬于特殊人群,宜低于成人參考值。但2022年發(fā)布《高同型半胱氨酸血癥的診斷、治療與預(yù)防專家共識(shí)》根據(jù)血清總同型半胱氨酸的濃度不同，分為輕度(15~30μmol/L)、中度(30~100μmol/L)和重度(>100μmol/L)?！吨袊?guó)高血壓防治指南（2018年修訂版）》中高同型半胱氨酸血癥的定義是Hcy大于等于15μmol/L，但2024版本中刪除了該表述。
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)HCY的檢測(cè)，西寶生物推出4株抗體及1款標(biāo)準(zhǔn)品及1款SAHH酶。具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
組合1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記吖啶酯；
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
組合3：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶；
2.3熒光免疫層析平臺(tái)
組合5：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜；
2.4穩(wěn)定性評(píng)估
2.4.1 各組分工作液穩(wěn)定性
采用SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將磁珠包被的SAH-BSA濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
采用SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將吖啶酯標(biāo)記的SAH抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
采用SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將SAH標(biāo)準(zhǔn)品配制成梯度進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
如表1所示：
a.磁珠包被SAH-BSA工作液?jiǎn)为?dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明磁珠包被SAH-BSA工作液熱穩(wěn)定性良好；
b.吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液?jiǎn)为?dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
c.SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度熱穩(wěn)定性良好。
表1 SAH各組分工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號(hào) | SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度（μmol/L） | 磁珠-包被SAH-BSA工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 | 吖啶酯標(biāo)記SAH抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 | SAH標(biāo)準(zhǔn)品梯度37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | -2.5% | 0.1% | 0.4% |
S1 | 1.3 | -5.6% | -2.4% | 1.4% |
S2 | 2.6 | -2.0% | 6.8% | 3.1% |
S3 | 13 | 0.4% | 3.1% | 5.2% |
S4 | 26 | -5.1% | 6.6% | 2.2% |
S5 | 52 | -5.4% | 4.2% | 4.0% |
平均變化 | -3.3% | 3.1% | 2.7% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合1與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90，相關(guān)性良好；
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合2與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90左右，相關(guān)性良好；
3.3熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光平臺(tái)SAH原料配對(duì)組合3與HCY試劑（酶循環(huán)法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R<sup>2</sup>＞0.90左右，相關(guān)性良好。
4. 測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
SAH原料配對(duì)組合1
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
樣本:樣品加樣量20ul；
試劑1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣本+20ul處理液1（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）混合，37℃孵育5min；
第二步：加入20ul處理液2（含S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合，37℃孵育5min；
第三步：加入50ul試劑1+50ul 試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第四步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
SAH原料配對(duì)組合2
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
樣本:樣品加樣量20ul；
試劑1：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣本+20ul處理液1（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）混合，37℃孵育5min；
第二步：加入20ul處理液2（含S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合，37℃孵育5min；
第三步：加入50ul試劑1+50ul 試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第四步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺(tái)
抗體配對(duì)組合3：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜
待測(cè)抗原:SAH標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：EAS0196F）
反應(yīng)條件：
50ul樣品+200ul處理液3（含DTT（貨號(hào)：DCH0005D）+腺苷（貨號(hào)：ACI0010A）+S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH）（貨號(hào)：ECE1043C）混合上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗 | EKY0169E | SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠+S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合2） |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原 | EAS0196E | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗 | DKY0169D | SAH配對(duì)：S-腺苷-L-同型半胱氨酸（SAH）單抗（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球+S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原（貨號(hào)：EAS0196C）劃膜（熒光免疫層析平臺(tái)配對(duì)組合3） |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH-BSA)抗原 | EAS0196C | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH）標(biāo)準(zhǔn)品 | EAS0196F | 質(zhì)控 |
SAH-BSA抗原（貨號(hào)：EAS0196E）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1380A | |
SAH抗體（貨號(hào)：DKY0169D）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1380B | |
SAH抗體（貨號(hào)：EKY0169E）吖啶酯濃縮液 | DKY1380C | |
SAH抗體（貨號(hào)：EKY0169E）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1380D | |
APS-5發(fā)光底物液（即用型） | ECD0532M | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
羧基磁性微球，1.2um | DEG0800D | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
重組堿性磷酸酶（高活性） | DCE0108L | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（300nm） | AEG0789E | |
SAH磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
SAH吖啶酯稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
SAH標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光） | \ | |
Adenosine（腺苷） | ACI0010A | |
DTT（二硫蘇糖醇） | DCH0005D | |
S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（SAHH） | ECE1043C |
